订书肽｜解锁胞内蛋白互作，突破传统多肽药物短板

       订书肽（Stapled Peptides），又称钉合肽，是通过化学交联（订书结构）将多肽锁定在稳定 α- 螺旋构象的人工修饰多肽。传统线性多肽在溶液中大多呈无规卷曲，很容易被蛋白酶降解，同时难以穿透细胞膜，限制了其在胞内靶点的应用。订书肽技术就是为了解决这一痛点，通过一根化学 “订书钉”，把多肽的活性二级结构固定住，是靶向蛋白 - 蛋白相互作用（PPI）的热门分子骨架。

一、核心原理

       α 螺旋是蛋白质相互作用最常见的结构基序。天然短肽脱离母体蛋白后，很难维持螺旋形态。订书肽在多肽链选定位置引入非天然烯基氨基酸，再通过烯烃复分解反应（RCM）形成烃类交联桥，也就是 “订书钉”，共价桥联 i 与 i+4 或 i 与 i+7 位氨基酸，将肽链强制固定为 α 螺旋构象《药学进展...。

区分要点：订书肽≠普通环肽。普通环肽一般是肽链首尾或侧链简单成环；订书肽的交联目的专门稳定 α 螺旋，保留螺旋的一面用于和靶蛋白结合，另一面的疏水订书结构还能辅助细胞膜穿透。

二、关键技术优势

       ✅ 构象稳定，提升结合亲和力：固定 α 螺旋之后，多肽不需要在溶液中自发折叠，直接以活性构象和靶标结合，大幅提高对靶点的亲和力，部分分子活性可提升数百至数千倍。

       ✅ 抗蛋白酶降解，体内半衰期显著延长：线性多肽极易被血清、细胞内蛋白酶剪切；订书结构限制肽链柔性，蛋白酶难以识别切割位点，稳定性大幅改善。

       ✅ 具备细胞穿透能力：稳定的两亲性 α 螺旋赋予订书肽跨膜能力，可以进入活细胞内部，靶向胞内蛋白 - 蛋白相互作用。而传统抗体大分子很难穿透细胞膜，小分子又很难干预大面积、平坦的蛋白互作界面，订书肽刚好填补这一空白。

       ✅ 靶点识别特异性强：依靠螺旋结构上大面积氨基酸接触面识别靶蛋白，特异性优于很多小分子，脱靶风险更低。

⚠️ 技术局限

1. 合成工艺复杂，需要引入非天然氨基酸，合成纯化成本高、规模化生产难度大；
2. 仍存在一定体内清除速度，药代性能距离成熟药物还有优化空间；
3. 订书位点、交联化学类型会直接影响活性、穿透性与毒性，需要大量构效筛选。

三、主要研发应用场景

1. 肿瘤靶点 PPI 抑制剂开发
   针对 Bcl-2 家族、Wnt 通路、RAS、Notch 通路等传统手段难以干预的胞内蛋白互作。例如靶向 Bcl-2 的订书肽，干扰抗凋亡蛋白的相互作用，诱导肿瘤细胞凋亡。
2. 抗病毒研发
   模拟受体 α 螺旋区域，阻断病毒蛋白与宿主受体结合，如新冠、HIV、呼吸道合胞病毒的入侵抑制研究。
3. 靶点验证与化学生物学工具
   作为探针，在细胞内研究蛋白互作功能，用于早期靶点确认，助力新药先导分子筛选。
4. 多肽药物先导分子改造
   对天然活性多肽进行钉合修饰，改善稳定性和成药性，是多肽药物优化的常用策略。

四、研发流程简述

1. 基于蛋白晶体结构，筛选参与 PPI 的 α 螺旋片段作为母肽；
2. 设计订书位点（i+4 /i+7），替换对应位置为非天然烯基氨基酸；
3. 固相合成多肽，进行烯烃复分解关环反应，构建烃类订书桥；
4. 纯化、表征：质谱、圆二色谱 CD 检测 α 螺旋度；
5. 体外亲和力评价（BLI/SPR）、细胞活性、稳定性与穿透性测试；
6. 多轮订书位置、序列优化，筛选最优先导订书肽。

总结

       订书肽依靠化学交联锁定活性 α 螺旋，一举解决传统多肽易降解、难进细胞两大痛点，成为靶向胞内蛋白互作、攻克 “不可成药” 靶点的重要分子类型。虽然合成成本与工艺还有挑战，但在肿瘤、抗病毒等创新药物早期研发领域，订书肽技术正在持续产出候选分子，是介于小分子和大分子抗体之间极具潜力的多肽药物形态。

       泰克生物（TekBiotech）依托深厚的靶向肽开发经验与一体化的多肽药物开发平台（包括筛选靶点设计、多肽筛选、订书肽设计与合成、亲和力检测、体外成药性评估和动物体内药效评估等），提供从临床前研究方案设计、靶向肽发现、订书肽（Stapled Peptide）开发到下游验证和药效评估的全程服务。泰克生物（TekBiotech）专注于攻克订书肽（Stapled Peptide）开发中的关键挑战——α-螺旋结构的稳定性（直接影响多肽的表面结合活性、亲和力、靶向特异性、代谢稳定性和细胞穿透性），以加速候选药物的开发进程，推动其从实验室走向临床。