酵母表面展示平台 纳米抗体高通量筛选服务

一、技术背景

       在治疗性抗体、纳米抗体及蛋白突变体定向进化研发中，如何实现不同亲和力抗体的分级筛选、活性精准分选是获得优质先导分子的关键。相较于传统噬菌体展示体系，酵母表面展示依托真核表达系统，可实现蛋白正确折叠、修饰与活性表达，配合FACS流式分选技术，能够精准区分高低亲和力克隆，完美适配纳米抗体开发、 scFv 单链抗体筛选、蛋白突变体高通量进化等高端研发需求。

       泰克生物搭建FACS流式分选+酵母表面展示高通量筛选平台，可满足客户亲和力前置分级筛选的定制化研发需求，覆盖多物种抗体发现与蛋白体外定向进化，为CAR-T/CAR-NK、靶向治疗抗体、高活性突变蛋白开发提供高质量技术支撑。

二、核心技术原理

       酵母展示体系依托酵母细胞壁Aga1p-Aga2p锚定表达系统，将外源目的基因（VHH、scFv、突变蛋白）与Aga2p基因末端融合表达；Aga2p通过二硫键与细胞壁固定的Aga1p稳定结合，使大量外源蛋白完整展示于酵母细胞表面。

       展示后的酵母文库可结合流式细胞分选（FACS）技术，根据抗原结合荧光信号强度，对不同亲和力克隆进行精准分群、分级富集，实现从低亲和力到超高亲和力抗体/突变体的梯度筛选，有效解决噬菌体展示无法精准区分亲和力差异的技术短板，大幅提升高活性先导分子筛选成功率。

三、核心服务范围

      泰克生物依托高质控酵母展示文库体系与成熟流式分选平台，可提供多类型定制化开发服务：

• 驼源VHH纳米抗体开发：针对各类药物靶点构建VHH酵母展示文库，高通量筛选特异性纳米抗体，适配CAR-T、靶向单抗药物研发；
• 多物种scFv单链抗体发现：支持驼源、兔源、鼠源、羊源等多物种抗体文库构建与特异性抗体筛选；
• 蛋白突变体体外定向进化：结合突变文库构建与流式高通量筛选，快速获得高活性、高稳定性蛋白突变体。

四、平台技术优势

1. 超高质量文库体系

       自建酵母展示文库库容可达10⁸级别，文库多样性、片段插入率、克隆阳性率均＞90%，文库覆盖度高、无效克隆少，充分保障稀有高活性克隆的筛选概率。

2. 真核活性表达，蛋白折叠更优异

       酵母为真核表达体系，可完成抗体、蛋白的正确折叠与修饰，展示的蛋白天然活性更高，筛选结果更贴合体内真实结合活性，规避原核噬菌体展示体系折叠缺陷、活性失真的问题。

3. FACS亲和力分级筛选，精准度更高

       依托流式分选技术，可根据结合信号强弱对抗体亲和力进行前置分级，精准区分低、中、高亲和力克隆，定向富集超高亲和力先导分子，适配高端抗体药物开发需求。

4. 优质动物免疫基础保障

       配备大型标准化动物免疫基地，实验动物背景清晰、健康可控，可稳定获得高免疫效价、高多样性免疫素材，为高质量抗体文库构建奠定基础。

5. VHH纳米抗体天然成药优势

       筛选获得的驼源VHH纳米抗体分子量仅15 kDa，具备体积小、穿透性强、稳定性高、免疫原性低等优势，是CAR-T/CAR-NK、实体瘤靶向治疗、多功能抗体药物的优质先导分子。

五、标准化项目流程

1. 靶点评估与方案定制：根据靶点类型、研发需求，确定文库类型与流式筛选策略；

2. 动物免疫与素材制备：标准化免疫操作，收获高质量免疫RNA；

3. 酵母展示文库构建：目的基因扩增、载体连接、酵母转化，完成文库质控；

4. 多轮FACS流式分选：梯度富集特异性、高亲和力阳性酵母克隆；

5. 单克隆测序与序列分析：聚类分析，筛选优势候选抗体/突变体序列；

6. 活性与亲和力验证：结合SPR/BLI、细胞实验完成候选分子活性表征；

7. 全套数据交付：交付文库质控数据、候选序列、实验报告。

六、典型应用场景

• 各类靶点驼源VHH纳米抗体高通量筛选与开发；
• 兔/鼠/羊等多物种scFv单链抗体发现；
• CAR-T、CAR-NK细胞治疗先导抗体分子发掘；
• 蛋白突变体定向进化，提升蛋白活性、稳定性与特异性；
• 需要亲和力分级筛选的高端治疗性抗体研发项目。

七、服务总结

       泰克生物酵母表面展示平台结合真核活性展示优势与FACS高通量分选技术，突破传统筛选体系局限，可实现多物种抗体、纳米抗体及蛋白突变体的精准分级筛选。依托10⁸级高质量文库、标准化动物免疫体系与严谨的流式筛选策略，高效富集高亲和力、高活性先导分子，全方位赋能抗体药物、细胞治疗与功能蛋白定向进化研发，加速临床前药物研发进程。