从生物信息设计到功能验证 人源化抗体工程全链条技术服务

一、服务概述

       鼠源单克隆抗体虽具备特异性强、易制备的优势，但异源蛋白易在人体内引发免疫排斥反应，极大限制了临床给药频次与治疗效果。传统嵌合、CDR 嫁接式抗体人源化方案，往往需要依托大量计算机分子模拟设计、多批次突变体亲和力筛选验证，存在实验周期长、研发成本高昂、亲和力易大幅下降等痛点。随着噬菌体、酵母、核糖体等体外抗体展示技术不断成熟，全人源抗体制备技术快速落地，可从源头彻底规避异源性抗体带来的免疫原性问题，成为肿瘤、自身免疫病、器官移植等领域治疗性抗体药物的主流研发方向。

       泰克生物深耕抗体工程领域多年，依托成熟的噬菌体展示、酵母表面展示两大高通量抗体筛选平台，结合生物信息学序列优化、抗体体外重组表达、亲和力表征与成熟改造技术，可一站式提供嵌合抗体制备、鼠源抗体人源化改造、全人源抗体文库筛选等技术服务，在最大限度保留原有抗体高亲和力、特异性的前提下，显著降低抗体免疫原性，全方位助力治疗性抗体临床前研发。

二、全人源抗体主流制备技术路线

（一）体外抗体展示文库筛选技术

1. 噬菌体展示技术

       通过 PCR 技术批量扩增人源全套抗体重链、轻链可变区基因，定向克隆至 M13 噬菌体载体，将人源抗体片段展示于噬菌体外壳蛋白表面。依托多轮 “抗原吸附 - 杂带洗脱 - 噬菌体扩增” 的亲和淘选，实现特异性全人源抗体高效富集。该技术实现抗体基因型与表型一一对应，筛选通量高、筛选周期可控，是目前全人源抗体发现应用最广泛的技术体系。

2. 核糖体展示技术

       属于无细胞体外筛选体系，将人源抗体可变区基因文库构建至核糖体翻译载体，在体外转录翻译体系中形成抗体片段 - 核糖体 - mRNA三元复合物。借助抗原亲和捕获筛选目标复合物，通过 RT-PCR 直接回收特异性抗体基因，可反复开展多轮富集筛选，不受宿主转化效率限制，尤其适合超高多样性抗体文库的稀有高活性全人源抗体挖掘。

3. 酵母表面展示技术

       将人源抗体片段与酵母凝集素基因融合，使抗体稳定展示于酵母细胞表面，依托真核表达体系实现抗体正确折叠与翻译后修饰。除传统液相固相淘筛外，可搭配流式细胞分选技术实现亲和力分级筛选，精准富集高特异性、高亲和力全人源抗体，大幅降低假阳性克隆比例，显著提升候选抗体成药性。

（二）转基因小鼠技术

       通过基因编辑手段敲除小鼠内源抗体编码基因，将全套人类免疫球蛋白基因组转入动物体内，免疫后可直接从动物脾脏、外周血 B 细胞中分离获得可分泌完整全长人源 IgG 的 B 淋巴细胞，经杂交瘤技术直接制备高亲和力全人源单克隆抗体。该方式获得的抗体具备天然完整的 Fc 结构域，体内药效、稳定性优异，多用于高端治疗性抗体药物开发。

（三）单细胞 PCR 技术

       从免疫人群、康复患者体内分离外周血单核细胞，利用流式分选、免疫磁珠筛选获得抗原特异性记忆 B 细胞、浆细胞；通过单细胞 RT-PCR、巢式 PCR 扩增单个 B 细胞的抗体重链、轻链可变区基因，克隆至含人源恒定区的真核表达载体，在 293T 等哺乳动物细胞中实现全长全人源抗体表达。后续借助 ELISA、WB、细胞功能实验验证抗体结合活性与药理功能，可高效快速获得靶向特定抗原的全人源单抗。

三、人源化 / 全人源抗体核心应用领域

1. 自身免疫性疾病治疗

       人源化、全人源单抗可特异性清除异常活化的免疫细胞、阻断炎症因子信号通路，抑制机体过度免疫病理损伤，目前已广泛用于类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化、溃疡性结肠炎等自身免疫病的临床治疗，也是新药研发的热门方向。

2. 恶性肿瘤靶向治疗

       针对肿瘤高表达特异性靶点（CD20、VEGF、CD33 等）开发的人源化抗体，可通过靶向结合、免疫细胞桥接、补体依赖杀伤等机制抑制肿瘤增殖侵袭，既可单独用于肿瘤治疗，也可作为 ADC、双特异性抗体的核心靶向分子，是抗肿瘤创新药物的核心研发赛道。

3. 器官移植抗排斥治疗

       利用靶向免疫细胞表面标志物的人源化单抗，可抑制移植术后机体产生的免疫排斥反应，保护心、肝、肾等移植器官正常生理功能，有效提升器官移植手术成功率与患者术后生存期。

四、泰克生物抗体人源化一站式技术服务

1. 生物信息学分析与人源化方案设计 
          依托抗体序列数据库开展胚系基因同源性比对、CDR 区定位、氨基酸保守性分析，精准框架区替换、定点突变设计，在规避免疫表位的同时最大程度保留抗原结合关键氨基酸位点，保障改造后抗体亲和力不发生大幅衰减。
2. 人源化抗体载体构建与序列验证
          针对多条候选人源化突变序列开展基因合成、载体构建、测序验证，构建哺乳动物细胞高表达重组质粒。
3. 瞬时表达、抗体纯化与活性鉴定
          利用 293F、CHO 悬浮细胞开展瞬时表达，经亲和层析获得高纯度人源化抗体，通过 ELISA、SPR、BLI 开展亲和力、特异性检测，筛选亲和力保留度优异的候选抗体株。
4. 抗体亲和力成熟优化（可选）
          针对亲和力下降的候选抗体，依托噬菌体 / 酵母展示平台开展随机突变、定点突变文库构建，经多轮筛选获得亲和力提升的优化抗体分子。

五、平台服务优势

1. 成熟的抗体工程经验：可稳定完成鼠源抗体 CDR 嫁接、框架区定点突变等多种人源化策略，确保改造后抗体亲和力维持在原有数量级。
2. 全流程闭环技术体系：从序列生物信息学设计、载体构建、细胞表达纯化到亲和力验证、亲和力成熟一站式交付，无需客户多平台对接。
3. 多技术路线灵活可选：既可对现有单抗开展人源化改造，也可依托全人源抗体文库直接筛选低免疫原性候选抗体，从源头规避免疫排斥风险。
4. 配套上下游延伸服务：可同步承接抗体稳定细胞株构建、细胞杀伤功能验证、体内药效评价等临床前研发服务，助力治疗性抗体药物管线快速落地。