酵母单杂交：解码 DNA 与蛋白的 "对话"

酵母单杂交技术（Y1H）是研究 DNA 与蛋白质相互作用的强大工具，为解析基因调控机制提供了关键视角。
其核心原理基于转录因子的模块化特性：将目标 DNA 序列（如启动子或顺式作用元件）与报告基因串联构建 "诱饵"，同时将待筛蛋白基因与转录激活域（AD）融合形成 "猎物"。当两者在酵母细胞内相遇，若蛋白能结合 DNA，AD 就会激活报告基因表达，通过酵母在选择性培养基上的生长或显色反应即可判定互作。
实验流程分三步：
*构建诱饵（目标 DNA + 报告基因）和猎物（蛋白 + AD）载体；
*共转化酵母细胞，利用缺陷型培养基筛选转化子；
*通过 3-AT 或 AbA 等筛选剂排除假阳性，验证阳性克隆。
该技术优势显著：无需纯化蛋白，直接在真核环境中模拟生理状态下的互作，还能从基因文库中高通量筛选未知结合蛋白。虽存在假阳性（内源激活因子干扰）等局限，但仍是鉴定转录因子、定位结合位点、探索基因调控网络的核心手段，广泛应用于植物抗逆机制、癌症相关通路等研究领域。
泰克生物提供酵母单杂交全套服务，涵盖载体构建、菌株转化及筛选优化，支持多系统选择，高效解决自激活问题，助力DNA-蛋白互作研究。