根据SYBRGREEN原理,循环反应结束之后。通常的方式就是从70度加热到90度,然后每隔一定时间(一秒或者少一秒。不知道PCR的荧光扫描头能不能做到)来测定系统荧光强度。随着温度的升高,dsDNAi都解开双链,sybrgreen都游离之后不发荧光,荧光逐渐下降,那么就画出一个荧光强度和温度的曲线:
然后我们运用高等数学的求导把荧光强度对温度求导得出下图: