CHO/HEK293抗体表达平台｜高效哺乳动物细胞表达｜快速重组抗体生产

抗体表达是生物医药领域的基础技术。它涵盖了从基因导入到蛋白质生产，再到纯化的全过程。了解各种表达系统和技术手段，能帮助我们更有效地完成抗体的研发和生产。
哺乳动物细胞表达系统：CHO和HEK293
哺乳动物细胞是表达抗体蛋白的常用细胞系，因为它们能做出符合人体的蛋白修饰。CHO表达系统已经被大量应用于抗体生产，主要因为它表达稳定，适合规模化制造。HEK293表达系统则更灵活，转染效率高，适合做抗体快速表达和初期筛选。
不同细胞系有各自的特点和适用场景，选择合适的哺乳动物细胞表达平台对后续的抗体质量和产量都有重要影响。
瞬时转染技术的优势
瞬时转染是快速表达重组抗体的常用方法。通过把抗体基因片段导入细胞，不用建立稳定株，就能在几天内获得大量蛋白。这对于抗体快速表达和功能验证很有帮助。尽管表达时间短，但如果优化转染条件，依然可以获得不错的产量。
稳定细胞株构建
相比瞬时转染，稳定细胞株构建更适合长期抗体生产。过程包括载体整合、筛选单克隆细胞、表达验证等。稳定细胞株能保持稳定的抗体表达水平，适合规模化抗体生产，也能保证产品批次之间的质量一致。
多样化的重组抗体表达
抗体表达不仅限于全长IgG，还包括Fab、scFv等片段。平台还能支持双抗表达，满足日益多样的研究需求。重组抗体的表达必须保证蛋白正确折叠和修饰，才能维持其生物活性。
抗体纯化与开发流程
表达出来的抗体还需要经过纯化。常用的方法有Protein A亲和层析、离子交换等，目的是去除杂质，获得高纯度抗体。抗体开发平台通常把筛选、表达、纯化整合起来，让抗体从基因到成品的过程更高效。

抗体表达平台依托CHO和HEK293等哺乳动物细胞表达系统，结合瞬时转染和稳定细胞株构建技术，可以满足从抗体快速表达到大规模生产的不同需求。
Q1: 抗体表达平台中CHO表达系统和HEK293表达系统的主要区别是什么？
A: CHO表达系统适合大规模、稳定的抗体生产，蛋白质修饰更符合工业化标准；HEK293细胞则转染效率高、表达速度快，常用于抗体快速表达和初步功能验证。选择时需根据项目阶段和需求确定。
Q2: 瞬时转染技术如何保证抗体快速表达的效率？
A: 瞬时转染通过优化转染试剂、质粒载体设计及细胞状态，最大化表达效率。虽然表达时间短（通常数天），但可快速获得高水平抗体，适合筛选和早期实验。
Q3: 稳定细胞株构建有哪些关键步骤？
A: 主要包括载体导入、药物筛选、单克隆细胞筛选和表达水平检测。稳定细胞株能持续、稳定表达目标抗体，适合后期放大生产和工艺开发
Q4: 什么是双抗表达，如何进行表达？
A: 双抗表达指同时表达两种不同抗体片段，形成具有双重特异性的抗体分子。通过优化表达载体和细胞系，确保双抗正确组装和功能实现。
Q5: 抗体纯化过程中常用的方法有哪些？
A: 主要包括Protein A/G亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析。纯化流程根据抗体特性定制，保证抗体高纯度和生物活性，满足后续应用需求。