【文献解读】淼灵质粒助力ASCOR驱动卵巢癌铂耐药研究

高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）是卵巢癌中更常见、更致命的亚型，铂耐药是导致患者预后不良的关键瓶颈。恶性腹水作为晚期HGSOC的典型特征，不但是肿瘤转移的“温床”，更潜藏着介导细胞间通讯、调控耐药微环境的关键分子。环状RNA（circRNA）在肿瘤耐药中的作用日益受到关注，但腹水来源circRNA在HGSOC铂耐药中的功能与机制尚不清楚。

2026年2月，中国科学技术大学附属医院团队联合中国科学技术大学生命科学与医学部团队，在国际知名期刊《Advanced Science》发表题为《Ascites circRNA ASCOR Drives Platinum Resistance of High-Grade Serous Ovarian Cancer by Facilitating RPA1 Nuclear Translocation》（IF=14.1）的研究论文。

淼灵生物（Miaoling Biotechnology,Wuhan,China）为该研究构建了ASCOR、RPA1过表达质粒及定点突变、蛋白截短突变质粒，平台以丰富的质粒资源助力科研团队开展circRNA功能机制研究。

一、临床发现：ASCOR在铂耐药患者腹水sEVs中明显上调，预示不良预后

研究以HGSOC腹水中的小细胞外囊泡（sEVs）为切入点，通过对铂敏感（n=7）与铂耐药（n=10）患者腹水sEVs行rRNA去除RNA测序，鉴定出460个差异表达的circRNA，其中ASCOR（hsa_circ_0000842，来源于RPRD1A基因外显子3-7，全长638nt）在铂耐药患者腹水sEVs中上调更为明显（平均倍数变化5.8，p<0.0001）。Sanger测序确认了ASCOR的反向剪接位点（BSJ），RNaseR消化实验证实其闭环结构。

临床相关性分析显示，ASCOR在铂耐药患者腹水sEVs及配对肿瘤组织中均明显高表达（铂耐药n=29vs铂敏感n=24），且高ASCOR水平与患者较短的无进展生存期（PFS）明显相关。此外，ASCOR主要来源于HGSOC细胞的自分泌分泌，HNRNPA2B1参与其包装进入sEVs。

二、功能验证：ASCOR通过细胞自主与sEVs传递双重途径促进铂耐药

在体外实验中，ASCOR过表达明显增强SKOV3和COV504细胞在顺铂处理下的细胞活力（IC50明显升高）和克隆形成能力，同时降低线粒体膜电位去极化、减少TUNEL阳性凋亡细胞、降低γH2AX荧光强度和彗星实验尾长。sEVs传递实验进一步证实，ASCOR过表达细胞来源的sEVs可被受体细胞摄取，并明显增强受体细胞的顺铂耐药表型。

在体内实验中，腹腔注射sEVs-ASCOR过表达或ASCOR高表达患者腹水来源sEVs的小鼠，在顺铂治疗下表现出更强的肿瘤生物发光信号、更高的Ki-67水平和更低的γH2AX水平。

该研究ASCOR全长过表达质粒、RPA1过表达质粒、定点突变质粒（ASCORMut-2）及蛋白截短突变质粒（RPA1Del-1/Del-2/Del-3、FLAG-RPA1）均由淼灵生物（MiaolingBio technology,Wuhan,China）构建，用于SKOV3和COV504细胞的稳定转染及功能实验。

三、机制解析：ASCOR-RPA1-DDX18轴驱动铂耐药的关键通路

机制上，研究者首先排除了ASCOR通过编码多肽或miRNA海绵机制发挥作用的可能性（AGO2RIP无富集，circRNADb预测无开放阅读框）。RNApulldown-MS联合catRAPID预测及RPA1RIP实验证实，ASCOR的motif-2区域与RPA1的66-127aa结构域直接相互作用。突变motif-2可消除ASCOR的促耐药表型，而过表达RPA1Del-1截短体则无法被ASCOR拉下。

免疫荧光及核质分离实验表明，ASCOR通过核孔复合体蛋白NUP153促进RPA1蛋白核转位。核内RPA1进一步招募RNA解旋酶DDX18，抑制DNA:RNA三链结构R-loop的异常积累，减轻DNA损伤。DDX18敲低可逆转ASCOR过表达导致的增殖增强和DNA损伤减轻。

四、下游信号：ASCOR-RPA1-DDX18轴触发PI3K/Akt通路

通过DDX18敲低细胞的RNA-seq和ASCOR高/低表达患者样本的snRNA-seq，研究者发现PI3K/Akt信号通路是ASCOR-RPA1-DDX18轴的关键下游效应通路。ASCOR过表达明显升高p-Akt、p-mTOR、p-S6和p-S6K水平，而DDX18敲低或Akt抑制剂MK-2206处理可逆转这些效应。

五、转化潜力：靶向ASCOR的ASO明显增强顺铂疗效

针对ASCOR反向剪接位点设计的反义寡核苷酸（ASO）在SKOV3细胞中可高效敲低ASCOR。在腹腔荷瘤小鼠模型中，ASO-ASCOR联合顺铂治疗可明显抑制肿瘤生长、降低Ki-67和p-Akt/p-mTOR/p-S6/p-S6K水平、增加γH2AX水平，显示出良好的转化治疗价值。

淼灵工具支持

淼灵生物（MiaolingBio technology,Wuhan,China）为原文研究所使用的ASCOR过表达质粒、RPA1过表达质粒、ASCOR定点突变质粒（Mut-2）及RPA1蛋白截短突变质粒（Del-1/Del-2/Del-3）提供了构建服务，质粒的稳定构建与高效转染为ASCOR-RPA1-DDX18轴的功能验证实验提供了关键工具保障。

在肿瘤耐药机制与circRNA功能研究中，基因过表达载体、定点突变载体、蛋白截短载体等是验证基因功能、解析信号通路的关键工具。淼灵质粒平台覆盖人源基因过表达质粒、慢病毒表达载体、双荧光素酶报告载体等全品类工具，可提供ASCOR等circRNA及RPA1、DDX18等靶基因的过表达、突变与干扰载体，支持sEVs功能验证、通路分析、表型检测等各类实验，助力肿瘤免疫与耐药机制研究高效推进。

研究图片均引用自原文献。

文献原文：https://advanced.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202518922