ATCC 19115 单核细胞增生李斯特菌：食品安全检测与培养基质控的核心标准菌株

关键词：ATCC 19115、单核细胞增生李斯特菌、食品安全检测、GB 4789.30、ISO 11290、培养基质控、GB 4789.28、李斯特菌检验

一、菌株基本信息

  • ATCC编号：19115
  • 菌种名称：单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）
  • 原始编号：Murray et al. Pirie
  • 分离来源：人类临床标本
  • 革兰氏反应：阳性（G+）
  • 形态：短杆菌，单个或短链排列，有鞭毛（25℃运动明显）
  • 生物安全等级：BSL-2
  • 基因组测序：已完成全基因组测序
  • 保藏机构：ATCC（美国典型培养物保藏中心）
  • 模式菌株：是（Listeria monocytogenes的模式菌株）

二、标准中的定位

ATCC 19115 是食品安全检测与培养基质控领域的核心标准菌株，在以下标准中被明确指定：

2.1 中国标准

  • GB 4789.30-2016：《食品安全国家标准 单核细胞增生李斯特菌检验》：ATCC 19115被指定为阳性对照菌株
  • GB 4789.28-2013：《食品安全国家标准 培养基和试剂的质量要求》：李斯特菌选择性培养基的质控指定该菌株
  • SN/T 0184.1-2010：《进出口食品中李斯特菌检验方法》：阳性对照参考菌株

2.2 国际标准

  • ISO 11290-1:2017：（食品中李斯特菌检测——第1部分：检测方法）：质控菌株参考
  • ISO 11290-2:2017：（食品中李斯特菌计数——第2部分：计数方法）：质控菌株参考

2.3 培养基性能验证

依据GB 4789.28，ATCC 19115在以下培养基上的质控要求：

  • 培养基：质控要求
  • PALCAM琼脂：典型菌落生长，灰绿色/黑色中心
  • 李斯特菌显色培养基：特征颜色反应
  • Oxford琼脂：典型菌落，黑色中心，周围黑色晕环
  • Fraser增菌液：二次增菌后浑浊变黑

三、食品安全检测中的应用要点

3.1 GB 4789.30 检验流程中的质控

依据现行国家标准，ATCC 19115作为阳性对照的完整检验流程：

  1. 样品前处理：25g样品+225mL LB1增菌液，30℃培养24h（一次增菌）
  2. 二次增菌：取0.1mL LB1增菌液转种10mL LB2增菌液，30℃培养24h
  3. 分离：LB2增菌液划线接种PALCAM琼脂或李斯特菌显色培养基，36℃培养24~48h
  4. 初步鉴定：典型菌落进行革兰染色、动力试验、溶血试验
  5. 生化确认：API Listeria或全自动鉴定系统

3.2 动力试验

ATCC 19115在动力试验中表现特征性：

  • 25℃半固体培养基：伞状生长（motile，有鞭毛）
  • 37℃半固体培养基：沿穿刺线生长（非运动状态）

这是李斯特菌属鉴别的关键指标：25℃有动力、37℃无动力，区别于伊氏李斯特菌（24℃和37℃均有动力）。

3.3 溶血特性

ATCC 19115（L. monocytogenes）在血平板上呈β溶血（清晰完全溶血），区别于：

  • 英诺克李斯特菌（L. innocua）：不溶血
  • 伊氏李斯特菌（L. ivanovii）：β溶血但双溶血环
  • 斯氏李斯特菌（L. seeligeri）：弱β溶血

3.4 PCR检测质控

在实时荧光PCR检测李斯特菌时，ATCC 19115应作为阳性对照：

  • 靶基因：hlyA（溶血素基因）、prfA（毒力调控基因）、iap（侵袭相关蛋白基因）
  • 阴性对照使用英诺克李斯特菌ATCC 33090或无菌水

四、培养与保藏技术要点

4.1 常规培养条件

  • 培养基：BHI琼脂/肉汤、TSB-YE（含酵母浸粉的胰酪胨大豆胨）
  • 培养温度：30~37℃（日常质控37℃即可；动力试验需25℃）
  • 培养时间：24~48h
  • 气体条件：兼性厌氧，常规大气

4.2 菌种保藏

  • 短期保藏：BHI斜面，2~8℃，每月传代1次，传代不超过5代
  • 长期保藏：20%甘油BHI肉汤冻存，-80℃或更低，避免反复冻融
  • 冷冻干燥保藏：ATCC原代冻干粉开封后立即复苏

4.3 形态鉴别要点

  • BHI琼脂上菌落小、圆形、光滑、灰白色
  • 革兰染色阳性短杆菌
  • 25℃湿片下可见翻滚式运动（tumbling motility）
  • CAMP试验阳性（与金葡菌ATCC 6538协同溶血增强）
  • 触酶试验阳性

五、常见问题与排障

  • 25℃动力试验不明显：培养温度偏高或鞭毛退化
  • PALCAM琼脂上不显典型黑晕：试剂质量或培养条件不合适
  • CAMP试验假阴性：金葡菌划线位置不当或菌量不足
  • 增菌后平板分离效果差：增菌液成分或选择性不够
  • 生化鉴定系统误判：数据库版本滞后

六、权威数据来源

关于我们

杭州康氧医疗器械有限公司专注于ATCC标准菌株、ATCC细胞、DSMZ标准菌株、CMCC菌种、CICC菌种等各类微生物标准菌株的供应。我们的菌株直接源自ATCC官方保藏中心，特性稳定、数据权威可溯源，广泛应用于制药、食品、化妆品、环保及科研领域的质量控制与检测验证。

  • 官网：www.kystrains.com

免责声明

本文内容基于ATCC官方数据、国家标准GB 4789系列及ISO标准整理，仅供专业技术交流参考，不构成任何商业推荐或采购建议。菌株的储存、使用及操作应严格遵守实验室生物安全规范及相关法规要求。具体产品信息请以ATCC官方网站（www.atcc.org）发布的最新资料为准。食品检测操作应严格按GB 4789.30-2016现行版完整条文执行。

posted @ 2026-08-10 16:37  杭州康氧医疗器械  阅读(0)  评论(0)    收藏  举报