ATCC 49619 肺炎链球菌:链球菌药敏试验质控与呼吸道感染研究的标准菌株

关键词:ATCC 49619、肺炎链球菌、药敏试验质控、CLSI M100、HTM培养基、血清型19F、肺炎链球菌MIC


一、菌株基本信息

  • ATCC编号:49619
  • 菌种名称:肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)
  • 分离来源:75岁男性患者痰液(美国亚利桑那州凤凰城)
  • 革兰氏反应:阳性(G+)
  • 形态:矛头状双球菌,有荚膜
  • 血清型:19F(丹麦命名法),Type 19(美国命名法)
  • 生物安全等级:BSL-2
  • 基因组测序:已完成全基因组测序
  • 保藏机构:ATCC(美国典型培养物保藏中心)
  • Preceptrol:是(ATCC优选质控菌株)
  • 保藏历史:ATCC ← J.H. Jorgensen ← M. Saubolle

二、药典与标准中的定位

ATCC 49619 是CLSI公认的肺炎链球菌药敏试验质控参考菌株,在以下标准中被明确指定:

2.1 CLSI标准

  • CLSI M100:(抗菌药物敏感性试验执行标准):Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 被列为肉汤微量稀释法MIC质控范围的标准菌株
  • CLSI M07:(需氧细菌抗菌药物敏感性稀释试验方法):肺炎链球菌MIC测定质控指定该菌株
  • CLSI M02:(抗菌药物药敏盘试验标准):纸片扩散法质控指定该菌株

2.2 微生物鉴定系统质控

  • BD Phoenix系统:菌种鉴定与药敏质控
  • Sensititre系统:自动化药敏MIC质控
  • VITEK 2系统:菌种鉴定质控

2.3 药典引用

  • USP <51>:防腐效力检查中虽以S. aureus为主,但呼吸道感染研究标准方法可引用该菌株
  • 中国药典:微生物限度检查中链球菌属质控参考

三、药敏试验质控中的应用要点

3.1 MIC质控范围

ATCC 49619 在CAMHB+2%~5%LHB(含溶解马血红蛋白的CAMHB)上的MIC质控范围(CLSI M100最新版参考值):

  • 抗菌药物:MIC质控范围(μg/mL)
  • 青霉素:0.25~1
  • 阿莫西林:0.03~0.12
  • 头孢曲松:0.03~0.12
  • 红霉素:0.03~0.12
  • 克拉霉素:0.03~0.12
  • 阿奇霉素:0.06~0.25
  • 万古霉素:0.25~1
  • 左氧氟沙星:0.5~2
  • 氯霉素:2~8
  • 四环素:0.12~0.5
  • 利奈唑胺:0.5~2
  • 甲氧苄啶-磺胺甲恶唑:0.12/2.4~0.5/9.5

注意: 上述MIC范围为参考值,请以CLSI M100最新版发布数据为准。

3.2 纸片扩散法质控

ATCC 49619 在含5%脱纤维羊血MHA上的抑菌圈直径质控范围:

  • 抗菌药物(纸片含量):抑菌圈直径质控范围(mm)
  • 青霉素(1μg,用OX测定):依CLSI判定标准
  • 红霉素(15μg):24~32
  • 万古霉素(30μg):20~27
  • 左氧氟沙星(5μg):20~27
  • 氯霉素(30μg):22~30

3.3 药敏试验操作关键注意事项

  1. 培养基要求:肺炎链球菌药敏必须使用CAMHB+2%~5%溶解马血红蛋白(LHB),或含5%脱纤维羊血的MHA——常规MHA上不生长
  2. 接种量:0.5麦氏浊度标准
  3. 培养条件:35℃、5% CO₂,20~24h读取
  4. 青霉素耐药判定:需用苯唑西林1μg纸片筛查,抑菌圈≤19mm提示可能青霉素耐药,再做MIC确认
  5. 每日质控:每批药敏试验应同步测试ATCC 49619

四、培养与保藏技术要点

4.1 常规培养条件

  • 培养基:ATCC Medium 44(BHI琼脂/肉汤)/ ATCC Medium 260(含脱纤维羊血TSA)
  • 培养温度:35~37℃
  • 培养时间:20~24h
  • 气体条件:5% CO₂

4.2 菌种保藏

  • 短期保藏:含血斜面,2~8℃,每周传代1次,传代不超过5代
  • 长期保藏:20%甘油BHI肉汤冻存,-80℃或更低
  • 冷冻干燥保藏:ATCC原代冻干粉开封后立即复苏
  • 重要提醒:肺炎链球菌在体外极易死亡,必须频繁传代或低温冻存,不宜室温久置

4.3 形态鉴别要点

  • 血平板上菌落小、圆形、光滑、湿润、α溶血(绿色不完全溶血环)
  • 革兰染色阳性矛头状双球菌
  • Optochin敏感试验阳性(抑菌圈≥14mm)
  • 胆汁溶菌试验阳性
  • 有荚膜(19F型)
  • 在不含血的培养基上不生长

五、常见问题与排障

  • 血平板上菌落不自溶:培养时间不足或菌株传代过多
  • Optochin试验假阴性:纸片含量不足或接种量过大
  • 药敏MIC超出质控范围:LHB含量不准或培养基不合规
  • CO₂培养对MIC影响:无CO₂环境下生长不良
  • 长期保存后复苏不活:肺炎链球菌对冻融敏感

六、权威数据来源

  • ATCC官方目录:https://www.atcc.org/products/49619
  • ATCC基因组门户:https://genomes.atcc.org/genomes/337528df522b4edc
  • CLSI M100 Ed33(2023):Antimicrobial Susceptibility Testing Execute Standards
  • Jorgensen JH, et al. Multicenter evaluation of the use of Haemophilus test medium for broth microdilution antimicrobial susceptibility testing of Streptococcus pneumoniae. J Clin Microbiol. 1992
  • CLSI M07-A11:Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests

关于我们

杭州康氧医疗器械有限公司专注于ATCC标准菌株、ATCC细胞、DSMZ标准菌株、CMCC菌种、CICC菌种等各类微生物标准菌株的供应。我们的菌株直接源自ATCC官方保藏中心,特性稳定、数据权威可溯源,广泛应用于制药、食品、化妆品、环保及科研领域的质量控制与检测验证。

  • 官网:www.kystrains.com

免责声明

本文内容基于ATCC官方数据、CLSI标准及国际药典整理,仅供专业技术交流参考,不构成任何商业推荐或采购建议。菌株的储存、使用及操作应严格遵守实验室生物安全规范及相关法规要求。MIC质控范围请以CLSI M100最新版发布数据为准,本文所列范围为参考值。具体产品信息请以ATCC官方网站(www.atcc.org)发布的最新资料为准。

posted @ 2026-08-10 16:34  杭州康氧医疗器械  阅读(0)  评论(0)    收藏  举报