ATCC 49619 肺炎链球菌:链球菌药敏试验质控与呼吸道感染研究的标准菌株
关键词:ATCC 49619、肺炎链球菌、药敏试验质控、CLSI M100、HTM培养基、血清型19F、肺炎链球菌MIC
一、菌株基本信息
- ATCC编号:49619
- 菌种名称:肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)
- 分离来源:75岁男性患者痰液(美国亚利桑那州凤凰城)
- 革兰氏反应:阳性(G+)
- 形态:矛头状双球菌,有荚膜
- 血清型:19F(丹麦命名法),Type 19(美国命名法)
- 生物安全等级:BSL-2
- 基因组测序:已完成全基因组测序
- 保藏机构:ATCC(美国典型培养物保藏中心)
- Preceptrol:是(ATCC优选质控菌株)
- 保藏历史:ATCC ← J.H. Jorgensen ← M. Saubolle
二、药典与标准中的定位
ATCC 49619 是CLSI公认的肺炎链球菌药敏试验质控参考菌株,在以下标准中被明确指定:
2.1 CLSI标准
- CLSI M100:(抗菌药物敏感性试验执行标准):Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 被列为肉汤微量稀释法MIC质控范围的标准菌株
- CLSI M07:(需氧细菌抗菌药物敏感性稀释试验方法):肺炎链球菌MIC测定质控指定该菌株
- CLSI M02:(抗菌药物药敏盘试验标准):纸片扩散法质控指定该菌株
2.2 微生物鉴定系统质控
- BD Phoenix系统:菌种鉴定与药敏质控
- Sensititre系统:自动化药敏MIC质控
- VITEK 2系统:菌种鉴定质控
2.3 药典引用
- USP <51>:防腐效力检查中虽以S. aureus为主,但呼吸道感染研究标准方法可引用该菌株
- 中国药典:微生物限度检查中链球菌属质控参考
三、药敏试验质控中的应用要点
3.1 MIC质控范围
ATCC 49619 在CAMHB+2%~5%LHB(含溶解马血红蛋白的CAMHB)上的MIC质控范围(CLSI M100最新版参考值):
- 抗菌药物:MIC质控范围(μg/mL)
- 青霉素:0.25~1
- 阿莫西林:0.03~0.12
- 头孢曲松:0.03~0.12
- 红霉素:0.03~0.12
- 克拉霉素:0.03~0.12
- 阿奇霉素:0.06~0.25
- 万古霉素:0.25~1
- 左氧氟沙星:0.5~2
- 氯霉素:2~8
- 四环素:0.12~0.5
- 利奈唑胺:0.5~2
- 甲氧苄啶-磺胺甲恶唑:0.12/2.4~0.5/9.5
注意: 上述MIC范围为参考值,请以CLSI M100最新版发布数据为准。
3.2 纸片扩散法质控
ATCC 49619 在含5%脱纤维羊血MHA上的抑菌圈直径质控范围:
- 抗菌药物(纸片含量):抑菌圈直径质控范围(mm)
- 青霉素(1μg,用OX测定):依CLSI判定标准
- 红霉素(15μg):24~32
- 万古霉素(30μg):20~27
- 左氧氟沙星(5μg):20~27
- 氯霉素(30μg):22~30
3.3 药敏试验操作关键注意事项
- 培养基要求:肺炎链球菌药敏必须使用CAMHB+2%~5%溶解马血红蛋白(LHB),或含5%脱纤维羊血的MHA——常规MHA上不生长
- 接种量:0.5麦氏浊度标准
- 培养条件:35℃、5% CO₂,20~24h读取
- 青霉素耐药判定:需用苯唑西林1μg纸片筛查,抑菌圈≤19mm提示可能青霉素耐药,再做MIC确认
- 每日质控:每批药敏试验应同步测试ATCC 49619
四、培养与保藏技术要点
4.1 常规培养条件
- 培养基:ATCC Medium 44(BHI琼脂/肉汤)/ ATCC Medium 260(含脱纤维羊血TSA)
- 培养温度:35~37℃
- 培养时间:20~24h
- 气体条件:5% CO₂
4.2 菌种保藏
- 短期保藏:含血斜面,2~8℃,每周传代1次,传代不超过5代
- 长期保藏:20%甘油BHI肉汤冻存,-80℃或更低
- 冷冻干燥保藏:ATCC原代冻干粉开封后立即复苏
- 重要提醒:肺炎链球菌在体外极易死亡,必须频繁传代或低温冻存,不宜室温久置
4.3 形态鉴别要点
- 血平板上菌落小、圆形、光滑、湿润、α溶血(绿色不完全溶血环)
- 革兰染色阳性矛头状双球菌
- Optochin敏感试验阳性(抑菌圈≥14mm)
- 胆汁溶菌试验阳性
- 有荚膜(19F型)
- 在不含血的培养基上不生长
五、常见问题与排障
- 血平板上菌落不自溶:培养时间不足或菌株传代过多
- Optochin试验假阴性:纸片含量不足或接种量过大
- 药敏MIC超出质控范围:LHB含量不准或培养基不合规
- CO₂培养对MIC影响:无CO₂环境下生长不良
- 长期保存后复苏不活:肺炎链球菌对冻融敏感
六、权威数据来源
- ATCC官方目录:https://www.atcc.org/products/49619
- ATCC基因组门户:https://genomes.atcc.org/genomes/337528df522b4edc
- CLSI M100 Ed33(2023):Antimicrobial Susceptibility Testing Execute Standards
- Jorgensen JH, et al. Multicenter evaluation of the use of Haemophilus test medium for broth microdilution antimicrobial susceptibility testing of Streptococcus pneumoniae. J Clin Microbiol. 1992
- CLSI M07-A11:Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests
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免责声明
本文内容基于ATCC官方数据、CLSI标准及国际药典整理,仅供专业技术交流参考,不构成任何商业推荐或采购建议。菌株的储存、使用及操作应严格遵守实验室生物安全规范及相关法规要求。MIC质控范围请以CLSI M100最新版发布数据为准,本文所列范围为参考值。具体产品信息请以ATCC官方网站(www.atcc.org)发布的最新资料为准。
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