ATCC 6538 金黄色葡萄球菌：消毒剂效能验证与药典质控的核心指示菌

关键词：ATCC 6538、金黄色葡萄球菌、消毒剂效能验证、防腐挑战试验、中国药典、USP <51>、ISO 20743、灭菌验证质控菌株

一、菌株基本信息

  • ATCC编号：6538
  • 菌种名称：金黄色葡萄球菌金葡亚种（Staphylococcus aureus subsp. aureus）
  • 原始编号：FDA 209
  • 分离来源：人类病灶
  • 革兰氏反应：阳性（G+）
  • 形态：球菌，葡萄串状排列，无芽孢，无鞭毛
  • 生物安全等级：BSL-2
  • 基因组测序：已完成全基因组测序
  • 保藏机构：ATCC（美国典型培养物保藏中心）
  • CRM版本：ATCC CRM-6538（认证参考物质，ISO 17025适用）

二、药典与标准中的定位

ATCC 6538 是全球药典体系公认的消毒剂效能验证核心指示菌株，在以下标准中被明确指定：

2.1 中国药典

  • 《中国药典》2020年版 四部通则：防腐效力检查法中指定金黄色葡萄球菌作为挑战菌株之一
  • 《消毒技术规范》：（2002年版）：消毒剂杀灭试验中，金黄色葡萄球菌为必测指示菌，ATCC 6538为推荐菌株编号

2.2 美国药典（USP）

  • USP <51> Antimicrobial Effectiveness Testing：防腐效力检查中指定Staphylococcus aureus ATCC 6538作为挑战菌株
  • USP <1211> Sterilization and Sterility Assurance：灭菌验证参考

2.3 欧洲药典（EP）

  • EP 5.1.3 Efficacy of Antimicrobial Preservation：防腐效力检查指定S. aureus ATCC 6538

2.4 日本药典（JP）

  • JP 第17改正：防腐效力试验中引用该菌株

2.5 国际标准

  • ISO 20743：纺织品抗菌活性测定中指定S. aureus ATCC 6538
  • ISO 22196：塑料及其他非多孔表面抗菌活性测量指定该菌株
  • MIL G-13734B：（军用规格）：ATCC推荐用于该标准规定的测试

2.6 ASTM标准

  • ASTM E2315：评估抗菌剂活性时指定该菌株

三、消毒剂效能验证中的应用要点

3.1 试验菌液制备

在消毒剂杀灭试验中，ATCC 6538的工作菌悬液制备流程如下：

  1. 从ATCC原代冻干粉或0代菌种复苏，接种于胰酪大豆胨液体培养基（TSB），3537℃培养1824h
  2. 取第35代新鲜培养物，用无菌稀释液洗涤并调整菌浓度至1×10⁷5×10⁷ CFU/mL（消毒试验要求）
  3. 菌悬液需在制备后2h内使用，避免菌体衰亡导致结果偏差

3.2 中和剂筛选

消毒剂含有抑菌残留成分时，必须预先筛选有效中和剂。常用中和体系：

  • 消毒剂类型：推荐中和剂
  • 含氯消毒剂：硫代硫酸钠溶液
  • 季铵盐类：卵磷脂+吐温-80复合中和
  • 醇类：无需特殊中和（稀释法即可）
  • 过氧化物类：硫代硫酸钠或过氧化酶

中和剂需经ATCC 6538验证：中和剂本身对菌株无杀灭作用，且能有效中和消毒剂残留。

3.3 定量杀灭试验判定标准

依据《消毒技术规范》要求：

  • 试验类型：判定标准
  • 杀灭90%（1log）：杀灭对数值 ≥1.00
  • 杀灭99.9%（3log）：杀灭对数值 ≥3.00
  • 杀灭99.999%（5log）：杀灭对数值 ≥5.00

四、防腐挑战试验中的应用

依据USP <51>和EP 5.1.3，将产品接种ATCC 6538（初始浓度1×10⁵~1×10⁶ CFU/mL），在规定温度下观察14天或28天内菌量下降情况：

  • A类标准（注射剂）：14天内细菌数下降不少于2log，14~28天不再增长
  • B类标准（局部用制剂）：14天内细菌数下降不少于2log，14~28天再下降不少于1log
  • C类标准（口服制剂）：14天内细菌数下降不少于1log，14~28天不再增长

五、培养与保藏技术要点

5.1 常规培养条件

  • 培养基：胰酪大豆胨琼脂（TSA）/ 液体（TSB）
  • 培养温度：35~37℃
  • 培养时间：1824h（琼脂），1618h（液体）
  • 气体条件：兼性厌氧，常规大气条件即可

5.2 菌种保藏

  • 短期保藏：TSA斜面，28℃，每月传代1次，传代不超过5代（05代用于质控）
  • 长期保藏：20%甘油肉汤冻存，-70℃~-86℃，避免反复冻融
  • 冷冻干燥保藏：ATCC原代冻干粉开封后立即复苏，不宜保存

5.3 形态鉴别要点

  • 菌落圆形、光滑、凸起、金黄色色素（部分菌株色素淡）
  • 革兰染色阳性球菌，葡萄串状排列
  • 血平板上β溶血
  • 凝固酶试验阳性（关键鉴别指标）

六、常见问题与排障

  • 菌悬液计数偏低：传代过多（>5代），菌体活性下降
  • 中和剂验证失败：中和剂本身对菌有毒
  • 消毒试验结果波动大：菌龄不统一或浓度不准
  • 复苏后不长：冻干粉开封操作不当或培养基不合适

七、权威数据来源

  • ATCC官方目录：https://www.atcc.org/products/6538
  • ATCC CRM-6533认证参考物质：https://www.atcc.org/products/crm-6538
  • USP <51> Antimicrobial Effectiveness Testing
  • EP 5.1.3 Efficacy of Antimicrobial Preservation
  • 《消毒技术规范》（2002年版）
  • ISO 20743:2013 Textiles — Determination of antibacterial activity
  • 中国药典2020年版 四部通则

关于我们

杭州康氧医疗器械有限公司专注于ATCC标准菌株、ATCC细胞、DSMZ标准菌株、CMCC菌种、CICC菌种等各类微生物标准菌株的供应。我们的菌株直接源自ATCC官方保藏中心，特性稳定、数据权威可溯源，广泛应用于制药、食品、化妆品、环保及科研领域的质量控制与检测验证。

  • 官网：www.kystrains.com

免责声明

本文内容基于ATCC官方数据、各国药典及国际标准整理，仅供专业技术交流参考，不构成任何商业推荐或采购建议。菌株的储存、使用及操作应严格遵守实验室生物安全规范及相关法规要求。具体产品信息请以ATCC官方网站（www.atcc.org）发布的最新资料为准。如涉及消毒验证、防腐效力试验等法规性检测，请参照现行版药典及相关标准的完整条文执行。

posted @ 2026-08-10 16:31  杭州康氧医疗器械  阅读(0)  评论(0)    收藏  举报