ATCC 9027 铜绿假单胞菌（副铜绿假单胞菌）：防腐效力挑战试验与消毒验证的核心质控菌

关键词：ATCC 9027、铜绿假单胞菌、副铜绿假单胞菌、防腐效力试验、USP <51>、EP 5.1.3、中国药典、消毒剂效能验证

一、菌株基本信息

  • ATCC编号：9027
  • 菌种名称：副铜绿假单胞菌（Pseudomonas paraeruginosa），原名铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）
  • 原始编号：R. Hugh 813
  • 革兰氏反应：阴性（G-）
  • 形态：直或微弯杆菌，单个或短链排列，有鞭毛（极生单鞭毛）
  • 生物安全等级：BSL-2
  • 基因组测序：已完成全基因组测序
  • 保藏机构：ATCC
  • CRM版本：ATCC CRM-9027（ISO 17025认证参考物质）

重要说明： 根据系统发育基因组学和比较基因组学研究，ATCC于近年将Pseudomonas aeruginosa strain R. Hugh 813（ATCC 9027）更名为Pseudomonas paraeruginosa。在实际药典和检测标准中，该菌株仍以"Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027"的编号被引用，实验记录中应同步标注新旧名称。

二、药典与标准中的定位

ATCC 9027是防腐效力挑战试验中最关键的革兰氏阴性指示菌株：

2.1 中国药典

  • 《中国药典》2020年版 四部通则：防腐效力检查法指定铜绿假单胞菌ATCC 9027

2.2 美国药典（USP）

  • USP <51> Antimicrobial Effectiveness Testing：明确指定Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027作为挑战菌株

2.3 欧洲药典（EP）

  • EP 5.1.3 Efficacy of Antimicrobial Preservation：指定Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027

2.4 日本药典（JP）

  • JP防腐效力试验：引用该菌株

2.5 国际标准

  • ISO 20743：纺织品抗菌活性测定
  • ISO 22716：化妆品GMP中微生物质量控制参考

三、防腐效力挑战试验中的应用

ATCC 9027在防腐效力试验中代表革兰氏阴性杆菌的挑战菌，其耐受性通常高于ATCC 8739（大肠埃希菌），是评价防腐体系对"顽固性"革兰氏阴性菌抑制能力的关键指标。

3.1 试验流程

  1. 制备工作菌悬液：取35代新鲜培养物，调整至1×10⁵1×10⁶ CFU/mL
  2. 接种至待测产品中，混匀
  3. 在2025℃（或3035℃，视产品类别）条件下放置
  4. 于0、14、28天取样，平板计数活菌数

3.2 判定标准（USP <51>）

  • 产品类别：14天要求
  • A类（注射剂）：下降≥2log
  • B类（局部用）：下降≥2log
  • C类（口服）：下降≥1log

3.3 为什么选ATCC 9027而非ATCC 8739？

  • 铜绿假单胞菌对防腐剂的天然耐受性更强（生物膜形成能力强）
  • 能更好反映防腐体系对"难控"革兰氏阴性菌的效力
  • 药典明确要求两者同时使用，分别代表不同耐受水平的G-菌

四、消毒剂效能验证中的应用

4.1 菌悬液制备

  • TSB培养1824h（3537℃），调整至1×10⁷~5×10⁷ CFU/mL
  • 需特别注意：铜绿假单胞菌在液体培养基中易形成生物膜，菌悬液制备时应充分震荡混匀

4.2 中和剂筛选

铜绿假单胞菌对季铵盐类消毒剂天然耐受，中和剂选择尤其重要：

  • 消毒剂类型：推荐中和体系
  • 季铵盐：卵磷脂3%+吐温-80 3%复合中和液
  • 含氯消毒剂：硫代硫酸钠0.5%
  • 过氧乙酸：硫代硫酸钠+磷酸盐缓冲液
  • 醇类：稀释法

五、培养与保藏技术要点

5.1 常规培养条件

  • 培养基：TSA/TSB（首选），也可用CIA（铜绿假单胞菌选择性琼脂）
  • 培养温度：35~37℃
  • 培养时间：18~24h
  • 气体条件：需氧

5.2 形态鉴别要点

  • 菌落扁平、边缘不规则、金属光泽、绿色色素（绿脓素）
  • 革兰阴性杆菌，极生单鞭毛
  • 氧化酶阳性（关键鉴别：与肠杆菌科区分）
  • 42℃生长阳性（与其他假单胞菌鉴别）

5.3 菌种保藏

  • 短期：TSA斜面2~8℃，每月传代
  • 长期：甘油冻存-70℃~-86℃
  • 注意事项：该菌株传代易产生变异，质控用菌应控制在0~5代

六、常见问题与排障

  • 菌落色素不明显：培养基缺铁或温度偏低
  • 菌悬液计数不稳：生物膜聚集
  • 防腐试验菌量不降：该菌天然耐受性强
  • 误用ATCC 10145：10145是模式株不是质控株

七、权威数据来源

关于我们

杭州康氧医疗器械有限公司专注于ATCC标准菌株、ATCC细胞、DSMZ标准菌株、CMCC菌种、CICC菌种等各类微生物标准菌株的供应。菌株直接源自ATCC官方保藏中心，特性稳定、数据权威可溯源，广泛应用于制药、食品、化妆品、环保及科研领域。

  • 官网：www.kystrains.com

免责声明

本文内容基于ATCC官方数据、各国药典及国际标准整理，仅供专业技术交流参考，不构成任何商业推荐或采购建议。菌株操作应严格遵守实验室生物安全规范及相关法规要求。具体产品信息请以ATCC官方网站（www.atcc.org）发布的最新资料为准。涉及防腐效力、消毒验证等法规性检测，请参照现行版药典及相关标准的完整条文执行。

posted @ 2026-08-10 16:25  杭州康氧医疗器械  阅读(0)  评论(0)    收藏  举报